技術(shù)的*性:
(一)靈敏度高
雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子,那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達(dá)不到這個(gè)水平(大于104個(gè)分子),但表明Elisa在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。
(二)特異性強(qiáng)
從免疫反應(yīng)的角度來說,Elisa與RIA的特異性應(yīng)該是。但在ELISA方法中,由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專一性,從而增加了該方法的特異性。
(三)對(duì)儀器設(shè)備要求不高,測定成本低
Elisa測定在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行,常用的儀器設(shè)備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)專用讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價(jià)格折算,酶標(biāo)儀的價(jià)格只及液閃儀的1/6至1/4,因此每測定一個(gè)樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,還可在野外進(jìn)行,操作十分方便。
(四)方法快速、簡便
均質(zhì)酶免疫測定方法操作時(shí),所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行,不需任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數(shù)分鐘便能得出結(jié)果。某些定性Elisa試劑盒,如國外生產(chǎn)的某些奶牛發(fā)情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒,數(shù)分鐘時(shí)間便能完成一次測定。
(五)試劑保存時(shí)間較長
作為檢測指示劑用的酶和酶標(biāo)記物,在低溫或干燥條件下相對(duì)穩(wěn)定,可保存半年至數(shù)年之久。
(六)自動(dòng)化程度高
Elisa由于不存在放射性同位素污染,因此,除加待測樣本需要人工操作外,其他各步驟均可用儀器自動(dòng)化完成。在這種自動(dòng)化條件下,平均每人每天可完成2000余個(gè)樣本的檢測工作。
(七)方法種類多
ELISA技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn),并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發(fā)展成為許多新方法。此外,發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因?yàn)椋?,用于ELISA技術(shù)的酶其種類遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣,有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa,并建立相應(yīng)的ELISA方法。相反,自然界的化學(xué)元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。*,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對(duì)應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠(yuǎn)大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/p>
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